一、血清沉淀物的成因

1.脂蛋白變性

胎牛血清中的脂蛋白在溫度驟變（如直接-20℃轉37℃解凍）時易發生變性聚集，形成白色絮狀物。研究表明，此類沉淀占解凍后沉淀總量的40%-60%。

2.纖維蛋白析出

低溫采集的血清殘留纖維蛋白原，解凍時轉化為纖維蛋白，形成肉眼可見的1-2mm絮狀物。該現象在未完-全過濾的血清批次中尤為明顯。

3.磷酸鈣結晶

37℃環境下磷酸鈣溶解度降低，產生云霧狀沉淀，顯微鏡下呈現布朗運動的黑點，易被誤判為微生物污染。

操作因素

反復凍融導致脂質聚集

熱滅活（56℃以上）引發蛋白變性

37℃長時間孵育加速沉淀生成

二、沉淀物對實驗的影響評估

數據表明，90%的沉淀不影響血清功能性，但磷酸鈣沉淀可能導致30%的誤判污染事件。

三、標準化防控技術規范

（1）解凍操作SOP

梯度解凍法

階段1：-20℃→4℃（16-24小時）

階段2：4℃→室溫（輕搖混勻）

禁忌：禁止直接37℃水浴解凍

離心參數優化

400g離心5分鐘（沉淀物去除率>95%）

濾膜孔徑≥0.22μm（避免營養流失）

（2）存儲管理要點

分裝凍存：單次用量分裝，避免反復凍融

溫度控制：-15℃~-20℃長期保存，2-8℃存儲≤1個月

（3）特殊場景處理

熱滅活需求：嚴格遵循56℃±1℃、30分鐘±2分鐘，全程渦旋震蕩

污染鑒別：采用瓊脂平板培養法替代目測觀察