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日期:2026-01-14瀏覽:17次
一、血清的收集與處理
采集方法
血清是通過靜脈采血獲得的,采血后血液在無抗凝劑條件下自然凝固,析出的淡黃色液體即為血清。采血時需使用無菌技術,避免溶血,因為溶血會釋放具有過氧化物酶活性的物質,導致ELISA等檢測方法出現非特異性顯色反應,影響結果準確性。
處理流程
凝固與離心:采血后,血液在室溫下靜置30分鐘至1小時,待完-全凝固。隨后以2500-3000轉/分鐘離心5-10分鐘,分離血細胞與血清。
保存條件:血清應分裝保存于-20°C或-80°C,避免反復凍融。短期保存可置于4°C,但不宜超過24小時。保存過程中若出現沉淀,使用前需再次離心。
注意事項
避免37°C長時間放置,以防血清混濁和成分降解。
熱滅活可能導致沉淀增多,若非必要,不建議進行此步驟。
二、血漿的收集與處理
采集方法
血漿通過靜脈采血獲得,采血時需使用抗凝劑(如EDTA、肝素鈉或枸櫞酸鈉)以防止血液凝固。采血后30分鐘內,需輕柔混合樣本10-20次,確保抗凝劑均勻分布。
處理流程
離心分離:混合后的血液在2-8°C條件下以5000-6000轉/分鐘離心5分鐘,分離血漿與血細胞。
保存條件:血漿應分裝保存于-20°C或-80°C,避免反復凍融。保存過程中若有沉淀形成,使用前需再次離心。
注意事項
避免溶血或高血脂樣本,以防檢測干擾。
使用前需檢查ELISA試劑盒說明書,確認抗凝劑兼容性。
三、尿液的收集與處理
采集方法
尿液樣本可通過自然排尿收集,常用方法包括晨尿、隨機尿或計時尿(如24小時尿)。采集時使用無菌容器,避免陰道分泌物、精液或糞便污染。
處理流程
離心分離:尿液在2-8°C條件下以5000-6000轉/分鐘離心5分鐘,分離上清液。
保存條件:上清液可保存于4°C(1-2天)或-20°C(1個月)。長期保存需分裝,避免反復凍融。
注意事項
尿液易受細菌污染,需立即冷藏或添加防腐劑(如甲苯)以防細菌繁殖和尿素分解。
計時尿需記錄總尿量和體積,以計算藥物排泄總量。
四、唾液的收集與處理
采集方法
唾液樣本可通過自然分泌或刺激分泌(如咀嚼無糖口香糖)收集。采集前1小時需禁食,并用清水或生理鹽水漱口以減少食物殘渣干擾。
處理流程
離心分離:唾液在2-8°C條件下以5000-6000轉/分鐘離心5分鐘,分離上清液。
保存條件:上清液可保存于4°C(短期)或-20°C(長期)。保存過程中若有沉淀形成,使用前需再次離心。
注意事項
唾液采集無-創且方便,適合兒童或頻繁采樣場景。
唾液pH和分泌量受飲食和情緒影響,需標準化采集條件。
五、細胞的收集與處理
采集方法
細胞樣本可通過組織活檢、血液分離或細胞培養獲得。血液樣本需使用抗凝劑(如肝素),組織樣本需在無菌條件下切取。
處理流程
分離與培養:血液樣本經離心分離血細胞后,可進行細胞培養。培養上清液需在2-8°C條件下以5000-6000轉/分鐘離心5分鐘,分離上清液。
保存條件:細胞可保存于液氮(長期)或-80°C(短期)。保存過程中需避免反復凍融,以防細胞損傷。
注意事項
細胞樣本易受污染,需嚴格無菌操作。
培養上清液需及時處理,以防分泌性成分降解。
六、總結與建議
標準化操作:所有樣本采集需遵循標準化流程,確保數據可比性。
質量控制:定期驗證樣本處理方法的準確性,如通過質控樣本檢測。
倫理與安全:涉及人體樣本時,需遵守倫理審查和知情同意原則。
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