日前，我公司錢在售后問題處理過程中，接到了遵義醫學院許老師的實驗，在問題描述中，許老師問道：“我做的ELISA沒有試劑盒，都是自己包板封閉孵育。做了很長時間，標準曲線的梯度都不好。剛加完顯色劑的時候梯度還算明顯，但是顯色比較淺，隨著時間延長(大概6、7分鐘)以后梯度就不明顯了。終止反應后測得的值梯度就沒有了。"請問這是怎么回事？

    關于許老師的疑問，錢為之安排的技術員解析道：

    ①樣本中有能夠催化底物的物質，沒洗下來。

    ②包被、酶標重新做梯度，先用較低的濃度把梯度摸索好，然后再優化靈敏度，zui后調出所需的靈敏度、線性范圍。

    ③是不是酶濃度太高，導致zui后顯色結果都是高的？

    ④包被-酶標系統不匹配或者酶標的非特異反應太強，或者酶標儀讀數范圍不夠，或者干脆酶標儀壞了。

    ⑤有條件的話，可以把酶免的蛋白系統移植到板式化學發光上，加完底物三分鐘讀數，這樣可能比較適合你。

    ⑥酶是自己標的么，見過有人把酶給標壞了出現這種情況的，HRP的話，比例不要太高，酶掛的太多了也不好的。 

    ⑦剛加完顯色劑時梯度明顯：顯色液是不是從高濃度向低濃度孔加的啊。

    ⑧蛋白系統靈敏度夠的話，顯色十分鐘就差不多了。

    看到我公司的問題分析內容后，許老師再贊上海滬鼎的服務效率好。以上內容就是錢今天給大家帶來的新學期ELISA曲線問題解析，了解更多。